10月18日，復旦大學研究團隊在期刊《Advanced Science》上發表了研究論文，題為“Increased PRP19 in Hepatocyte Impedes B Cell Function to Promote Hepatocarcinogenesis”，本研究中，研究人員對高和低B細胞浸潤的HCC樣本的表達差異進行了探索，以識別關鍵調節因子。研究發現，抑制PRP19表達促進了腫瘤組織中B細胞浸潤，并阻礙了HCC的生長。機制上，共免疫沉淀（Co-IP）實驗揭示，PRP19與DDX5相互作用，導致DDX5蛋白的泛素化和降解。減弱的DDX5會破壞CXCL12 mRNA的穩定性，通過CXCL12/CXCR4軸抑制B細胞招募和漿細胞分化。此外，在小鼠模型中，采用CXCR4+ B細胞的過繼轉移結合CXCL12治療有效地抑制了HCC的發生，從而重塑了免疫反應。PRP19、DDX5和浸潤B細胞的表達被認為是HCC患者的臨床預后指標。總的來說，這項研究為HCC免疫治療提供了有價值的見解，通過靶向PRP19并調節腫瘤浸潤B細胞的免疫功能來改善臨床療效。
01 背景信息
肝細胞癌（HCC）是肝癌最常見的類型，仍然是全球范圍內的健康挑戰。大多數HCC病例通常發生在炎癥的肝臟、炎癥狀態和腫瘤微環境中的免疫反應，這可以顯著影響惡性腫瘤的生物學行為。早期對免疫療法的研究發現，由免疫細胞調節的抗腫瘤反應可以作為治療實體或血液腫瘤的有效工具，尤其是對T細胞和巨噬細胞。在腫瘤微環境中，腫瘤浸潤的B細胞是適應性免疫系統的關鍵組成部分，具有顯著的功能多樣性，包括抗原呈遞細胞（APC）、細胞因子產生細胞和分泌抗體的漿細胞等不同亞群。進一步研究腫瘤微環境中的B細胞可能為調節免疫反應和對HCC進行有意義的治療干預提供重要方法。
腫瘤浸潤性B細胞的功能特征及其對腫瘤免疫的影響仍存在爭議。在人類惡性腫瘤中，B細胞高度異質性，表現出不同的促腫瘤和抗腫瘤作用。早期研究報道CD20+ B細胞具有抗腫瘤特性；然而，調節性B細胞（Bregs）通過上調IL-10和TGF-β主要驅動腫瘤進展。在結直腸腫瘤中，研究人員發現了一種由亮氨酸代謝誘導的特殊B細胞亞群，即LARS B細胞，通過抑制B細胞線粒體NAD+再生和氧化代謝促進腫瘤免疫逃避。到目前為止，調節B細胞浸潤和功能以促進腫瘤發展的關鍵因素尚未闡明。PRP19是PRP19相關復合物的關鍵成員，具有多種生物學功能，如DNA損傷響應、腫瘤放療抵抗和蛋白質泛素化。然而，PRP19表達與HCC腫瘤微環境中B細胞功能之間的關系尚不清楚。
02 PRP19缺乏通過促進B細胞浸潤抑制HCC進展
為了深入了解PRP19在肝癌發生過程中B細胞功能中的作用，研究人員在體外建立了PRP19敲除小鼠肝癌細胞，并將對照組和PRP19敲除HCC細胞通過皮下注射注入小鼠體內。令人驚訝的是，研究人員觀察到PRP19敲除組小鼠腫瘤體積更小，腫瘤生長速度更慢。流式細胞術顯示PRP19敲除小鼠肝癌組織中B細胞水平更高。CD4+T、CD8+T和CD115+單核細胞在對照組和PRP19敲除組之間沒有顯著差異。PRP19免疫組織化學染色和B細胞標記CD20的免疫組化染色支持流式細胞術的結果。
PRP19缺乏促進B細胞浸潤，抑制肝癌的進展
為了研究PRP19在調節B細胞遷移方面的作用，研究人員收集了外周血單個核細胞（PBMCs），并在體外與HCC細胞共培養。研究人員采用流式細胞術（FCM）研究招募的CD19+ B細胞比例。結果表明，與PRP19過表達的HCC細胞共培養時，B細胞的遷移傾向較差。然而，與PRP19敲除共培養組相比，招募的B細胞比例有所增加。此外，研究人員發現HCC細胞中PRP19表達的變化對T細胞的遷移能力沒有影響。進一步在3D HCC球體中測量B細胞遷移能力，發現PRP19敲除HCC球體中B細胞的滲透率較高。接下來，研究人員探索了B細胞在HCC進展中的作用。首先，研究人員使用抗CD20抗體刪除小鼠B細胞，并通過FCM確認了刪除效果。此外，在B細胞刪除和野生型小鼠中，使用對照和PRP19敲除Hepa1-6細胞構建了原位肝腫瘤模型。研究人員發現，與對照組相比，PRP19敲除抑制了小鼠HCC的發展。然而，B細胞的缺失削弱了PRP19敲除對小鼠肝癌發展的抗腫瘤作用。這些發現表明，在肝癌細胞中抑制PRP19可能會誘導B細胞浸潤，阻礙肝細胞癌的發生，而B細胞的缺失會削弱PRP19抑制的腫瘤抑制作用。
03 HCC組織中PRP19、DDX5和CD20+B細胞水平相關，并可作為HCC患者的預后指標
研究人員測量了120例來自中山醫院的HCC樣本中PRP19和DDX5的表達以及CD20+B細胞的浸潤情況。根據H-評分，研究人員將HCC患者分為PRP19低表達、中等表達和高表達三組。PRP19低表達組患者的DDX5表達和CD20+B細胞浸潤較高。然而，高PRP19表達的HCC患者的DDX5表達和CD20+B細胞浸潤較低。相關性分析表明，PRP19在HCC患者中與DDX5表達呈負相關，而DDX5與CD20水平呈正相關。Kaplan-Meier生存分析顯示，HCC患者中PRP19高表達預示總體生存率低和腫瘤復發率高。相反，DDX5水平低的患者術后臨床預后不佳，復發率高，這與之前的研究一致。此外，研究人員發現PRP19和DDX5水平高的患者在四個組中預后最差。綜合數據表明，PRP19通過調節DDX5和CXCL12的水平，在B細胞免疫功能障礙中發揮著關鍵作用，并且與HCC的不良預后存在臨床相關性。
04 結論
總之，本研究揭示了PRP19表達與HCC發生過程中B細胞功能之間的聯系。通過DDX5介導的CXCL12-CXCR4軸，PRP19抑制促進B細胞招募以抑制HCC腫瘤發生。此外，研究人員闡明了在小鼠模型中，通過重塑TME，將CXCR4+B細胞的過繼轉移與CXCL12治療相結合，可以有效抑制HCC發生。因此，本研究為通過靶向PRP19并調節B細胞免疫功能來治療HCC提供了理論依據。
